جداسازی یک سویه باکتریایی هایپرترموفیل تولید کننده آنزیم لیپاز مقاوم حرارتی از بیوتوپهای آبهای معدنی گرم و بهینه سازی شرایط تولید آنزیم

نمونه های جدا شده از چشمه آب گرم در مشکین شهر پس از رشد باکتری های ترموفیل در محیط پایه و کم÷لکس برای غربال گری باکتری تولید کننده لیپاز مقاوم به حرارت به ترتیب در محیط تری بوتیرین آگار و رودامین کشت داده شد . پس از مشاهده هاله شفافا در محیط ذکر گردیده باکتری ها در محیط کشت مایع هختصاصی تولید لیپاز تلقیح گردید. سپس میزان فعالیت آنزیم سنجش گردید.با برریس بهینه سازی محیط کشت با هدف افزایش تولید مشخص گردید بهترین منبع کربن گلوکز و بهترین منبع نیتروژن فسفات آمونیوم و پپتون می باشد.به منظور خالص سازی نسبی آنزیم ابتدا سوپرناتانت محیط کشت که محتوی عصاره آنزیم است با روش رسوب دهی با سولفات آمونیوم خالص و تغلیظ گردید.سپس سوپرناتانت محتوی آنزیم با هدف حذف نمک اشباع بر روی ستون کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون برده شد. فراکسیون های مختلف از نظر فعالیت آنزیم مورد سنجش قرار گرفت و نمونه با بالاترین فعالیت به عنوان آنزیم نسبتا خالص انتخاب و نگهداری شد.